{"id":13205,"date":"2020-05-30T08:00:44","date_gmt":"2020-05-30T08:00:44","guid":{"rendered":"https:\/\/planetabiologia.com\/?p=13205"},"modified":"2022-11-24T11:39:37","modified_gmt":"2022-11-24T11:39:37","slug":"tecnicas-de-manipulacao-de-dna-e-de-marcacao-por-radioisotopos","status":"publish","type":"post","link":"https:\/\/planetabiologia.com\/tecnicas-de-manipulacao-de-dna-e-de-marcacao-por-radioisotopos\/","title":{"rendered":"T\u00e9cnicas de manipula\u00e7\u00e3o de DNA e de marca\u00e7\u00e3o por radiois\u00f3topos"},"content":{"rendered":"

T\u00e9cnicas recentes permitem identificar a regi\u00e3o do material gen\u00e9tico que cont\u00e9m a receita para a fabrica\u00e7\u00e3o de subst\u00e2ncias de interesse. Um amplo campo de estudos tem sido aberto com o desenvolvimento de diversas t\u00e9cnicas de manipula\u00e7\u00e3o de DNA, permitindo identificar segmentos espec\u00edficos desse \u00e1cido nucleico e, em seguida, transferir esses segmentos de um organismo a outro (transgenia) ou mesmo fabricar sequ\u00eancias espec\u00edficas de DNA.<\/p>\n

Observe, na figura abaixo, as col\u00f4nias de bact\u00e9rias cultivadas em uma placa de Petri e sua colora\u00e7\u00e3o. O DNA das bact\u00e9rias da cultura passou a conter um peda\u00e7o de DNA proveniente do material gen\u00e9tico de medusa, sendo nomeado DNA recombinante. A receita para a fabrica\u00e7\u00e3o da prote\u00edna luminosa veio, portanto, do DNA da medusa. A utiliza\u00e7\u00e3o das tecnologias de manipula\u00e7\u00e3o do DNA pode se estender desde a agricultura at\u00e9 outras \u00e1reas, permitindo, por exemplo, a identifica\u00e7\u00e3o de pessoas com base em pequenas quantidades de DNA presentes em fios de cabelos ou em poucas c\u00e9lulas de sangue.<\/p>\n

\"Se
Cultura de bact\u00e9rias que receberam um segmento de DNA de medusas fluorescentes. As bact\u00e9rias adquiriram a capacidade de produzir a prote\u00edna que provoca esse brilho especial.\u00a0– Blueiridium<\/a>, CC0, via Wikimedia Commons<\/figcaption><\/figure>\n

O uso de subst\u00e2ncias com \u00e1tomos radioativos (radiois\u00f3topos) foi decisivo em diversos experimentos hist\u00f3ricos. A base da t\u00e9cnica de marca\u00e7\u00e3o por radiois\u00f3topos consiste em administrar subst\u00e2ncias marcadas com part\u00edculas radioativas a c\u00e9lulas vivas, bases nitrogenadas ou amino\u00e1cidos, por exemplo, e localizar a radia\u00e7\u00e3o, logo em seguida, em partes da c\u00e9lula ou em produtos, como os \u00e1cidos nucleicos.<\/p>\n

Em pesquisa biol\u00f3gica, utilizam-se elementos radioativos de baixa periculosidade, emissores de part\u00edculas-Beta. Essas part\u00edculas n\u00e3o atravessam obst\u00e1culos finos, como folhas de papel e de alum\u00ednio, sendo de uso seguro.<\/p>\n

A t\u00e9cnica de marca\u00e7\u00e3o radioativa pode ser combinada com a autorradiografia, na qual um filme fotogr\u00e1fico especial \u00e9 sobreposto \u00e0 montagem microsc\u00f3pica. Os elementos radioativos produzem manchas t\u00edpicas na chapa fotogr\u00e1fica, evidenciando sua localiza\u00e7\u00e3o. Outra t\u00e9cnica consiste em usar uma subst\u00e2ncia que deposita gr\u00e2nulos de prata onde h\u00e1 radia\u00e7\u00e3o, o que evidencia a localiza\u00e7\u00e3o das subst\u00e2ncias.<\/p>\n

Abaixo, uma fotomicrografia de bact\u00e9rias ao microsc\u00f3pio eletr\u00f4nico de transmiss\u00e3o (TEM) com t\u00e9cnica de autorradiografia. A bact\u00e9ria da parte superior da foto foi cultivada em meio que continha timina (base nitrogenada dos \u00e1cidos nucleicos) com hidrog\u00eanio radioativo.<\/p>\n

\"Fotomicrografia<\/p>\n

A bact\u00e9ria marcada com \u00e1tomos radioativos foi colocada em uma cultura diferente e transmitiu a radioatividade a outras bact\u00e9rias (manchas claras), evidenciando a capacidade de transmiss\u00e3o de material gen\u00e9tico. A bact\u00e9ria maior tem cerca de 2 \u03bcm.<\/p>\n

Por meio de t\u00e9cnicas como essa, foi poss\u00edvel acompanhar a atividade celular e constatar que quase todas as mol\u00e9culas de uma c\u00e9lula viva est\u00e3o constantemente sendo degradadas e repostas, mesmo quando a c\u00e9lula n\u00e3o est\u00e1 em crescimento ou divis\u00e3o. Da mesma forma, o tr\u00e2nsito de subst\u00e2ncias pela c\u00e9lula p\u00f4de ser compreendido, em sua din\u00e2mica, por estudos que utilizaram essa t\u00e9cnica.<\/p>\n

Veja todas as aulas dessa s\u00e9rie<\/h2>\n